pMAL™ 蛋白融合表达系统(停产,有替代)–NEB

产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 :大肠杆菌

pMAL™ 蛋白融合表达系统(停产,有替代)                              收藏

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#E8200S
1 set
6,709.00元

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停产通知

产品于2020 年 6 月 30 日停产,替代产品为:NEBExpressTM MBP 融合表达及纯化系统(E8201)

单独出售的相关产品

Amylose 树脂
#E8021V 10 ml . . . . . . .¥1,179
#E8021S 15 ml . . . . . . .¥1,779
#E8021L 100 ml . . . . . . .¥8,609
 
Xa 因子蛋白酶
#P8010V 25 μg . . . . . . . . ¥379
#P8010S 50 μg . . . . . . . . ¥729
#P8010L 250 μg . . . . . . .¥2,889
 
pMAL-p5X 载体
#N8109S 10 μg . . . . . . .¥1,069
 
pMAL-c5X 载体
#N8108S 10 μg . . . . . . .¥1,069

 

 

特性

 超过 75% 的蛋白可获得高效表达,蛋白产量可达 100 mg/L
 可在细胞质或周质中表达:在周质或SHuffle® 细胞质中表达均可提高二硫键的形成,促进蛋白折叠
 增强可溶性:MBP 融合蛋白增强了蛋白质在大肠杆菌中的可溶性
 采用麦芽糖温和洗脱:无去污剂或变性剂对蛋白活性产生影响 

对于产品详细描述和 pMAL-p5X 载体图谱,包括 MCS(多克隆酶切位点),请见目录 386 页。关于pMAL 载体序列文件,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com 查询。

概述

pMAL 系统是一种高效的蛋白融合表达及纯化系统。pMAL 载体含有编码麦芽糖结合蛋白(maltosebinding protein, MBP)的大肠杆菌 malE 基因,其下游的多克隆位点便于目的基因插入,表达 N 端带有 MBP 的融合蛋白。通过“Ptac”强启动子和 MBP 翻译起始信号使克隆基因获得高效表达,并利用 MBP 对麦芽糖的特异性结合实现融合蛋白的一步亲和纯化(图 1)。

此系统的 pMAL 载体在邻近多克隆位点处含有一段编码特异性蛋白酶识别位点的序列,从而便于纯化后将目的蛋白与 MBP 切割分离,并且目的蛋白不含任何来自载体的氨基酸。为了实现这一目的,多克隆位点中有一限制性内切酶识别位点正好位于特异性蛋白酶识别位点处,同时也是目的基因插入的位点。

pMAL 系列载体可从 1 升的培养液中表达出 100 mg 的融合蛋白。大部分情况下,表达出的融合蛋白是可溶的,因为 MBP 已经被证实可提高大肠杆菌中表达蛋白的可溶性。尽管没有一种表达系统适用于所有克隆基因,但 pMAL 蛋白融合表达和纯化系统经证实:在被检测的已知蛋白中,有超过 75% 能表达出稳定产量。

由于 pMAL-c5X 载体上删除了 malE 信号序列,因此融合蛋白在细胞质中表达。而 pMAL-p5X 载体含有 malE 信号序列,它将引导融合蛋白穿越质膜进入细胞周质。
 

pMAL™ 蛋白融合表达系统(停产,有替代)--NEB
图 1:pMAL 系统流程示意图。

pMAL 蛋白融合表达和纯化系统组成

  – pMAL-c5X, pMAL-p5X
– Amylose 树脂(结合容量 ~6-8 mg/ml 体积)
– Xa 因子蛋白酶
– MBP5(SDS-PAGE 电泳用 marker)
– MBP5-paramyosin-ΔSal
(Xa 因子蛋白酶切割的对照蛋白)
– E. coli ER2523(NEB 表达用感受态细胞)

参考文献

关于本产品特点与应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。 

EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶–NEB

产品资料 – 基因编辑 – 应用于CRISPR工作流程中的NEB特色产品

EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶                              收藏

EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶--NEB EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶--NEB EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶--NEB

货 号
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#M0653S
70 pmoles
839.00元

#M0653T
2,000 pmoles
2,999.00元

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特性

·   体外切割 dsDNA

·   通过直接导入有活性的核酸酶复合物进行基因编辑。

概述

 EnGen ® Lba Cas12aCpf1 核酸酶识别富含 T TTTN PAM 序列,为基因打靶开辟了额外的基因组区域。所需 gRNA短,仅40-44 个碱基。其有两个核定位信号,提高运输到细胞核的效率。其切割产物为5′ 突出端。该酶的活性温度区间为 16-48℃。与氨基酸球菌(Acidaminococcus)的同源酶相比,在更低温度下活性依然良好,能用于编辑冷血动物基因组,如斑马鱼和非洲爪蟾等。高浓度酶可用于显微注射、电转和脂质体转染.

反应条件

 1X NEBuffer™ 2.137 温育

热失活

 65°C10 min

浓度

 1 µM100 µM

质保声明

 EnGen ® Lba Cas12aCpf1经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com www.neb-china.com

参考文献

 关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com www.neb-china.com

Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶序列识别和 DNA 剪切工作原理示意图

 EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶--NEB

Monarch 质粒小提离心柱–NEB

产品资料 – 核酸纯化 – 质粒小提

Monarch 质粒小提离心柱                              收藏

货 号
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上海库存
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#T1017L
100 columns
1,079.00元

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Description

Monarch Plasmid Miniprep Columns, supplied with the Monarch Plasmid Miniprep Kit, have been custom designed to deliver excellent performance for your plasmid purification. Monarch Columns are designed without a frit (which is commonly used in purification columns to hold the membrane in place), eliminating buffer retention and the risk of carry-over contamination. The tapered design of the Miniprep Column enables elution in as little as 30 μl. Monarch columns use less plastic than conventional columns, reducing their environmental footprint without compromising performance. The columns fit snugly into the collection tubes to enable easy handling. The Monarch Miniprep Columns also feature a convenient tab so that you can label your columns easily without removing them from your tube rack. Monarch columns are suitable for use with centrifugation and vacuum purification protocols. 

Monarch Plasmid Miniprep Column Design

Monarch 质粒小提离心柱--NEB

Learn More About Monarch

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  • Optimize your results with our unique column design
  • Enhance your DNA purification experience
  • Feel good about choosing Monarch
  • Choose Monarch kits for pure value

Highlights

  • No buffer retention/risk of carryover contamination
  • Low elution volume (≥ 30 μl)
  • Convenient tab for easy labeling
  • Snug fit into collection tubes for easy handling
  • Made with less plastic than conventional columns

 

Properties and Usage

Storage Temperature

25°C

Binding Capacity

20 µg 

DNase I(无 RNase)–NEB

产品资料 – RNA 试剂 – 二代测序 RNA 文库制备试剂

DNase I(无 RNase)                              收藏

DNase I(无 RNase)--NEB DNase I(无 RNase)--NEB DNase I(无 RNase)--NEB DNase I(无 RNase)--NEB

货 号
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上海库存
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#M0303L
5,000 units
3,149.00元

#M0303S
1,000 units
779.00元

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特性

 转录反应后 DNA 模板的降解
 除去 RNA 样品中的基因组 DNA 污染
 DNase I 印迹分析
 切刻平移

概述

DNase I(无 RNase)是一种非特异性核酸内切酶,切割 DNA 产生具有 3´ 羟基和 5´ 磷酸末端的二核苷酸、三核苷酸和寡核苷酸产物。DNase I 可以作用于单链 DNA、双链 DNA、染色质和 RNA:DNA 杂交链。 

来源

重组 E. coli 菌株,含有牛胰腺 DNase I 的 MBP 融合克隆。 

反应条件

1X DNase I 反应缓冲液
[10 mM Tris-HCl (pH 7.6 @ 25℃) ,2.5 mM MgCl2,0.5 mM CaCl2],37℃ 温育。
热失活:75℃ 10 分钟。 

质保声明

无 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,10 分钟完全分解 1 μg pBR322 DNA 所需要的酶量。
完全降解是指绝大多数的 DNA 片段降解成为四核苷酸或更短的核苷酸。 

浓度

2,000 units/ml。 

注意事项

为避免酶失活过程中 RNA 被降解,应添加终浓度为 5 mM 的 EDTA。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

XmaI–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

XmaI                              收藏

XmaI--NEB XmaI--NEB XmaI--NEB XmaI--NEB XmaI--NEB XmaI--NEB XmaI--NEB XmaI--NEB

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#R0180L
2,500 units
3,019.00元

#R0180M
(高浓度5X)2,500 units
3,049.00元

#R0180S
500 units
719.00元

#R0180V
250 units
379.00元

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识别位点

XmaI--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 50%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、省时酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。

浓度

10,000 和 50,000 units/ml。

甲基化敏感性

对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。

注意事项

Xmal 是 Smal 的不完全同裂酶。Xmal 产生 5´ 突出端,而 Smal 产生平末端片段。。
甘油浓度 > 5% 条件下可能出现星号活性。

Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG–NEB

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – qPCR & RT-qPCR

Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG                              收藏

货 号
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上海库存
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#M3019E
2000 rxns
26,279.00元

#M3019L
500 rxns
8,379.00元

#M3019S
200 rxns
3,719.00元

#M3019X
1000 rxns
14,889.00元

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特性

 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 可精准检测目标 RNA,多重扩增检测性能优异,一次可检测多达 5 个靶标。

·   单管预混液剂型使反应体系的建立更便捷

·   4X 浓度的预混液可增加样品加入量,提高 RT-qPCR 灵敏度

·   一次可检测多达 5 个靶标,增加检测通量

·   Luna 温启动反转录酶与 Taq 热启动 DNA 聚合酶联合使用,提高反应特异性及稳定性,并可室温建立体系

·  预混液中包含 UDG dUTP防止模板残留污染

·   无干扰的可见示踪染料避免加样错误

·   点击 COVID-19 research 了解 NEB 如何将多种 RT-qPCR 病毒检测方法用于新冠研究

产品说明

  Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 用于探针法实时荧光定量检测靶标 RNA。首先反转录酶将 RNA 转化为 cDNA,然后 DNA 聚合酶对 cDNA 进行扩增,完成靶标的实时荧光定量 PCR(qPCR),整个过程在单管内一次性完成。基于探针法的 qPCR / RT-qPCR 原理是利用聚合酶的 5´ → 3´ 外切酶活性,将淬灭的目标特异性探针切断发出荧光,并实时监测荧光值的增加,以测量每个循环中的 DNA 扩增。在荧光信号显著超过背景荧光的位置,可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品的靶基因相对丰度。


该预混液基于探针法化学原理,采用一步法 RT-qPCR 流程,因此可与 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒(NEB #E3006)进行对比
 
 1:用于一步法 RT-qPCR 实验的新产品
 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG--NEB
 
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 预混液,含 UDG 为 4X 浓度,因此在靶标 RNA 量极低的应用中(例如:病原体检测),可提高样品加入量。通过对 个靶标进行不同浓度的线性、灵敏度检测,显示该产品在多重检测中性能更优。该预混液将一步法 RT-qPCR 所需组分整合到单个试管中,包括:Luna 温启动反转录酶、Taq 热启动 DNA 聚合酶、dNTP 和小鼠 RNase 抑制剂。Taq 热启动 DNA聚合酶与新型温启动反转录酶联合使用,可通过基于适配体的可逆抑制来双重控制酶的活性。这种温控活化机制可避免热循环前的非特异扩增,从而让室温建立体系更安全。经改造的 Luna 温启动反转录酶具有更高的热稳定性,最佳反应温度为 55°C。此外,预混液还添加了独特矫对染料,可与多种 qPCR 仪器兼容,包括需要高 ROX 或低 ROX 参比信号的仪器。

图 2:使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 对不同 RNA 病毒进行检测显示性能卓越
 
 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG--NEB
使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 对 SARS-CoV-2N1)和流感病毒 H1N1HA)进行  RT-qPCR。反应体系为 20 ul,对 5-log 浓度梯度样品进行扩增性能评估,使用两台荧光定量仪器进行平行测试。(A10–100,000 拷贝合成 SARS-CoV-2 RNA 对照 2Twist BiosciencesSKU102024)溶于 10 ng Jurkat 总 RNA 中(BioChain,#R1255815-50)。(B12.4–124,000 拷贝甲型流感病毒(H1N1RNAATCC®VR-95DQ™)溶于 10 ng Jurkat 总 RNA 中。结果显示两个病毒靶标扩增的灵敏度和线性度都很理想。
 
图 3:使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 进行多重检测(个靶标)
 
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG--NEB

 
使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 对 5-log 浓度梯度的 Jurkat 总 RNA100 ng-10 pg)进行多重 RT-qPCR,实验仪器为 Bio-Rad CFX96 荧光定量仪。结果显示了 个人源靶基因的扩增标准曲线和扩增效率。反应体系(20 μl)中引物和探针浓度均为 200 nM,反应设置为产品推荐的循环条件。在该多重反应中,个靶标均检测到良好的线性度、扩增效率和 R2 值。
 
 4Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG 性能优于其它品牌
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG--NEB
 
图 5RT-qPCR 避免模板残留污染的评估
 
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG--NEB
为了评估不同试剂盒对去除模板残留物的能力,首先使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒制备含 U RT-qPCR 产物。然后使用三种不同的 RT-qPCR 预混液(均包含 UDG),将~105 拷贝的含 U 产物作为模板进行 qPCR。按照各品牌的操作说明,在第二个反应开始时进行 25°C 孵育使 UDG 降解含 dU 样品,以降低其产生(假)阳性信号的能力。ΔCq 是进行残留处理及未处理的循环数的差值。ΔCq 值越大说明去除残留产物的效率越高。使用 Luna 预混液去除污染后,一个样品中含 U 产物完全消化,另一个样品 ΔCq 较大。注意:在真实污染案例中,污染的 DNA 量很难评估/预测。

该预混液包含无荧光的可见蓝色示踪染料,有助于透明管加样。该示踪染料与 qPCR 常用荧光基团的光谱没有重叠,也不会干扰实时检测。

Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液,含 UDG--NEB

 
 
 

 

紫色凝胶上样染料 6X,无 SDS–NEB

产品资料 – Markers 和 Ladders (DNA/RNA 和蛋白质) – DNA Ladders

紫色凝胶上样染料 6X,无 SDS                              收藏

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北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#B7025S
4.0 ml
619.00元

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概述

在 NEB 所有非预染的 DNA Ladder 中都包含紫色凝胶上样染料(含或不含 SDS),与其它染料相比,条带更加锐利并且消除了紫外的阴影。该预混的上样缓冲液包含两种染料,染料一(粉红/红色)和染料二(蓝色)。红色染料可以在琼脂糖电泳和非变性丙烯酰胺电泳中做为指示染料。两种染料在琼脂糖凝胶电泳过程中分离,红色染料作为指示染料与溴酚蓝迁移率一致。更具体的说,该染料不会在紫外成像时留下阴影。混合液中同时含有EDTA 用来螯合酶反应过程中的镁(最多到 10 mM),从而使反应终止。染料中同时含有聚蔗糖,相比甘油混合的染料可以得到更亮更紧实的条带。紫色的 6X 凝胶上样染料含有 SDS,条带更清晰锐利,避免由于有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。

紫色凝胶上样染料 6X,无 SDS--NEB

彩色预染蛋白 Standard,宽范围 (11–245 kDa)(停产有替代)–NEB

产品资料 – Markers 和 Ladders (DNA/RNA 和蛋白质) – 蛋白 Markers 和 Ladders

彩色预染蛋白 Standard,宽范围 (11–245 kDa)(停产有替代)                              收藏

货 号
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北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#P7712L
750 gel lanes
5,699.00元

#P7712S
150 gel lanes
1,229.00元

#P7712V
75 gel lanes
759.00元

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停产通知

 请注意:该产品已停产,库存售完为止,替代产品为P7719.

相关产品

Blue Loading Buffer Pack
Red Loading Buffer Pack
 

描述

NEB 提供一系列非预染、预染和彩色预染(有两种预染颜色的条带方便辨认)的高纯度的蛋白Standards。蛋白标准分子量范围覆盖 10-245 kDa,可以用作多种表达蛋白的准确分子量评估参照。NEB 蛋白 Standards 条带清晰,间距适当,易于辨认。
彩色预染蛋白 Standard,宽范围 (11–245 kDa)(停产有替代)--NEB

浓度

浓度:0.2-0.75 mg/ml。

推荐上样体积:

3 μl

注意事项:

用于样品分子量精确判断时,请使
用 NEB 非预染蛋白 Standard,宽范围。

BaeGI–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

BaeGI                              收藏

BaeGI--NEB BaeGI--NEB BaeGI--NEB BaeGI--NEB BaeGI--NEB BaeGI--NEB BaeGI--NEB

货 号
规 格
价 格
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#R0708L
2,500 units
3,079.00元

#R0708S
500 units
729.00元

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识别位点

BaeGI--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 75%
NEBuffer 2.1: 75%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 25%

特性

重组酶、省时酶。

反应条件

NEBuffer 3.1,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。

浓度

10,000 units/ml。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

BaeGI 是 Bme1580I 的完全同裂酶。

HhaI(星选酶)–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

HhaI(星选酶)                              收藏

HhaI(星选酶)--NEB HhaI(星选酶)--NEB HhaI(星选酶)--NEB HhaI(星选酶)--NEB HhaI(星选酶)--NEB HhaI(星选酶)--NEB HhaI(星选酶)--NEB HhaI(星选酶)--NEB

货 号
规 格
价 格
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#R0139L
10,000 units
2,769.00元

#R0139S
2,000 units
659.00元

#R0139V
1,000 units
349.00元

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识别位点

HhaI(星选酶)--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、省时酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。

浓度

20,000 units/ml。

甲基化敏感性

对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。

注意事项

HinP1l 是 Hhal 的不完全同裂酶。
Hhal 产生 3´ 突出端,而 HinP1l 产生 5´ 突出端。

MspI(星选酶)–NEB

产品资料 – 表观遗传学 – 其它用于表观遗传学分析的限制性内切酶

MspI(星选酶)                              收藏

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货 号
规 格
价 格
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#R0106L
25,000 units
2,819.00元

#R0106M
(高浓度5X)25,000 units
2,819.00元

#R0106S
5,000 units
689.00元

#R0106T
(高浓度5X)5,000 units
689.00元

#R0106V
2,500 units
359.00元

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识别位点

MspI(星选酶)--NEB

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反应条件

CutSmart 缓冲液,37℃。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

更多产品使用信息,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com

SARS-CoV-2 阳性对照(N 基因)–NEB

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 阳性对照品

SARS-CoV-2 阳性对照(N 基因)                              收藏

货 号
规 格
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北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#N2117S
50 ul
839.00元

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产品特点

·包含完整的核衣壳蛋白基因(N gene)
·含有 T7 RNA 启动子序列,可产生 RNA 转录本
·质粒骨架为 pUC19,可在大肠杆菌中增殖
·为 Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒(NEB #E3019)的组分之一
 

产品描述

 SARS-CoV-2 阳性对照(N 基因)以质粒形式提供,其中含 SARS-CoV-2 N-基因(GenBankMN908947.3),以及 T7 RNA 启动子序列,如有需要可生成 RNA 转录本。该产品用于靶向 N 基因的 SARS-CoV-2 检测方法(如:RT-qPCRLAMP 等)的验证。浓度为 1,000,000 拷贝/μl

注意:在绝对定量实验中,不建议将该阳性对照的浓度作为绝对拷贝数。

cAMP 依赖性蛋白激酶(PKA),催化亚型–NEB

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白激酶

cAMP 依赖性蛋白激酶(PKA),催化亚型                              收藏

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#P6000L
500,000 units.
6,639.00元

#P6000S
100,000 units
1,659.00元

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相关产品

5´ -三磷酸腺苷(ATP)

概述

可逆性地在蛋白质上添加磷酸基对真核细胞信号转导起着重要作用,蛋白磷酸化和去磷酸化参与调节细胞活动的各个方面。随着已知蛋白激酶数量飞速增长,确定细胞中哪种蛋白激酶与哪种底物相互作用就变得更具挑战性。通过对比磷酸化位点的氨基酸序列与已知底物序列来找到的共有磷酸化位点序列已被证实是一种有效方法,这些序列有助于预测潜在的蛋白质底物中特定蛋白激酶磷酸化位点。
 
由于决定蛋白激酶特异性涉及复杂的三维结构,这些较短的氨基酸序列只描述了磷酸基接受位点周围的一级结构,因此把问题简单化了(见综述 1),没有考虑到二级及三级结构,也没有考虑到其它多肽链或者同链中位置稍远处的因素,此外,在特定序列中并不是所有残基对于激酶的识别及磷酸化具有同等影响,因此,使用这些序列时应该慎重。
 
另一方面,这些共有序列已经被证实是识别的关键序列,简单化了的序列使得它们在研究蛋白激酶与其底物中更有用。基于共有序列合成的寡肽,除了能预测磷酸化位点以外,往往还是蛋白激酶活性测定的理想底物。
 
下表列出了 NEB 提供的蛋白激酶特异性序列,磷酸基接受位点用红色标出,可以进行功能替换的氨基酸用斜红色(/)标出,对识别贡献不大的氨基酸用“X”表示。cAMP 依赖性蛋白激酶(PKA),催化亚型--NEB

 

pSNAP-tag(T7)-2 载体–NEB

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

pSNAP-tag(T7)-2 载体                              收藏

货 号
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#N9181S
20 µg
1,979.00元

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特性

 提供可在哺乳动物和细菌中表达的载体
 
pSNAP-tag(T7)-2 载体--NEB
 
pSNAP-tag(T7)-2 载体--NEB

概述

NEB 提供几种表达载体,该载体能表达携带有 SNAP-tag 和 CLIP-tag 的融合蛋白,适用于在哺乳动物及细菌中标记,相应的启动试剂盒也包含有相应的载体。哺乳动物 SNAPf 和 CLIPf 载体表达 SNAP- 和 CLIP-tags 的速度较之前的载体更快。表达载体中,tag 的上、下游具有改造后的多克隆位点,使得 tag 可以表达在目的蛋白的任何一端,该表达过程受 CMV 启动子调控。SNAPf-tag 和 CLIPf-tag 表达载体中携带新霉素抗性基(NeoR),可用于筛选稳定转染子。载体上还带有一个 IRES 元件,有助于融合蛋白和 NeoR 的高效表达。为在哺乳动物细胞中高效表达,Tag 基因中的密码子已经过优化。NEB 还提供对照质粒,这些质粒编码的融合蛋白分别定位于细胞(H2B)、线粒体(Cox8A)和细胞表面(ADRβ2, NK1R),启动试剂盒中包含相应的对照质粒(见 290 页)。
 
细菌表达载体 pSNAP-tag(T7)-2 包含位于 SNAP-tag 上、下游的克隆位点,受 T7启动子调控。为在E. coli中高效表达,SNAP-tag 基因中的密码子已经过优化。

来源

通过标准的质粒纯化程序,分离自 E. coli 菌株。质粒无内毒素污染,可用于高效转染。

浓度

500 μg/ml。

限制图谱

pSNAPf 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 389 页。查看所有表达载体和对照质粒的序列和图谱文件,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。
 
pSNAP-tag(T7)-2 载体--NEB

Monarch 基因组 DNA 结合缓冲液–NEB

产品资料 – 核酸纯化 – 基因组DNA提取

Monarch 基因组 DNA 结合缓冲液                              收藏

货 号
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#T3014L
65 ml
1,339.00元

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特性

从多种样本(细胞、血液、组织和其他)中提取高质量gDNA
极低的 RNA 残留(通常< 1%)
提取的 gDNA 片段更长(最高峰值≥50kb)
操作便捷友好,提取快速,裂解充分
试剂盒可以纯化基因组DNA
试剂盒组分可以单独购买
Monarch基因组 DNA 提取试剂盒是NGS实验中NEBNext建库产品的完美补充。提取的长片段DNA,是长读长测序平台的上游纯化的首选。

概述

 Monarch基因组 DNA 提取试剂盒是NGS实验中NEBNext建库产品的完美补充。提取的长片段DNA,是长读长测序平台的上游纯化的首选。

Monarch 基因组 DNA(gDNA)提取纯化试剂盒集细胞裂解、RNA 去除和完整 DNA 纯化为一体,可用于多种生物样品如培养细胞、血液和哺乳动物组织。对难裂解的样品如细菌和酵母,试剂盒提供加强裂解步骤,以获得裂解充分的样品。说明书中还详述了临床样品如唾液和颊粘膜拭子的 gDNA提取过程,对于已经提取的 gDNA样品,说明书同样详述了快速纯化步骤。提取的 gDNA具有最高质量,通常A260/280>1.8、A260/230>2.0、高DIN 分值和极低残留 RNA。本试剂盒提取的 gDNA适用于终点 PCR、qPCR 和NGS 文库制备等多种下游应用。 峰值片段大小一般是50-70kb,特别适用于长读长测序平台。

组分

 Monarch基因组 DNA提取试剂盒组分
-Monarch 基因组 DNA 纯化柱
-Monarch 收集管II
-Monarch基因组 DNA 组织裂解缓冲液
-Monarch基因组 DNA 细胞裂解缓冲液
-Monarch基因组 DNA 血液裂解缓冲液
-Monarch基因组 DNA 结合缓冲液
-Monarch 基因组 DNA 洗涤缓冲液
-Monarch 基因组 DNA 洗脱缓冲液
-Monarch RNase A
-蛋白酶 K,分子生物学级
 
Monarch 基因组 DNA 结合缓冲液--NEB
Monarch 基因组 DNA 结合缓冲液--NEB
 
Monarch 基因组 DNA 结合缓冲液--NEB
Monarch 基因组 DNA 提取试剂盒可以从多种样本中高效提取高质量、高分子量的基因组DNA。
每个样本各取100 ng基因组DNA,用0.75%琼脂糖胶电泳上样。血液、培养的细胞和组织用标准说明书,颊粘膜拭子、唾液、革兰氏阴性菌和阳性菌用补充说明书进行提取。起始材料:1X106Hela 细胞、100 μl人类血液、10 μl鸟类血液、10 mg冷冻组织粉末、1个颊粘膜拭子、500 μl唾液和~ 1X109 细菌细胞。使用Lambda DNA-Hind III digest (NEB #N3012)作为 marker 上样于最后一条泳道。提取出的 gDNA 样本用Genomic DNA ScreenTape® ,在 Agilent Technologies® 4200 TapeStation® 上进行分析。样本通常产量峰值在 50-70 Kb之间,DINs在9左右。在准备颊粘膜拭子和唾液的过程中,不可避免会出现细胞破损,这会导致形成弥散状的低分子量凋亡条带。
Monarch 基因组 DNA 结合缓冲液--NEB

 Monarch基因组 DNA提取试剂盒提取出的高质量基因组DNA适用于长片段PCR 和 qPCR 等灵敏下游实验。

A:每个样本用 25ng 人DNA作为模板,用 LongAmp® Hot Start Taq 2X Master Mix(NEB #M0533)和特异引物分别扩增出6、8、10、12 、16 、20 kb的扩增子产物。PCR反应在Applied Biosystems® 2720 热循环仪中进行。Hela细胞 DNA 和人源血液基因组 DNA 用 Monarch试剂盒提取,与商业化的人源细胞系 NA19240 F11 参照 DNA 进行比较。分别取 10 ul上样于1.5%的琼脂糖胶,用 1 kb DNA Ladder(NEB #N3232)作为 Marker。胶图结果显示DNA高度完整,非常适合长片段PCR。
B:从人全血、Hela细胞和小鼠鼠尾用Monarch试剂盒提取基因组 DNA,10 倍系列稀释 5 次作为起始 DNA 模板浓度。在Bio-Rad® CFX Touch qPCR thermal cycler仪器中,用Luna® 通用 qpcr预混液(NEB#M3003) 和 特异引物对gHEME(人类全血)和gREL(Hela,小鼠鼠尾)进行PCR检测。实验结果显示 DNA 具有高纯度,不含抑制剂,非常适合qPCR。
 

 

α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶–NEB

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 糖苷外切酶

α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶                              收藏

α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶--NEB α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶--NEB α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶--NEB α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶--NEB α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶--NEB

货 号
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#P0748L
2,000 units
6,489.00元

#P0748S
400 units
1,619.00元

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识别位点

 α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶--NEB

概述

α1-2,3,4,6 岩藻糖苷酶是一种具有高度特异性的糖苷外切酶, 催化水解寡糖中 α 1 – 2 、α1-3、α1-4 及 α1-6 连接的 l-岩藻糖残基。

来源

克隆自牛肾脏并在 E. coli 中表达。

反应条件

1X GlycoBuffer 1 反应缓冲液。添加 100 μg/ml BSA,37℃ 温育。热失活:100℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X GlycoBuffer 1 反应缓冲液,100X BSA。

分子量

51,800 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染,无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内将 1 nmol Fucα1-2Galβ1-4Glc-AMC 中超过 95% 的 α-L-岩藻糖水解所需要的酶量。

浓度

8,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

CLIP-Cell 阻断剂–NEB

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

CLIP-Cell 阻断剂                              收藏

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#S9220S
100 nmol
1,749.00元

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特性

 不可逆阻断
 适用于脉冲追踪实验

概述

阻断剂是非荧光底物,在细胞内(SNAP-Cell Block和 CLIP-Cell Block)或活细胞表面(SNAP-Surface    Block 和 CLIP-Cell Block)阻断 SNAP- 或 CLIP-tag 的反应。在 SNAP- 或 CLIP-tag 融合蛋白的活细胞和体外标记实验中,可以用阻断剂制备无荧光对照。
 
SNAP- 和 CLIP-Cell 阻断剂可顺利透过细胞膜,一旦进入细胞,即与 SNAP- 或 CLIP-tag 反应,使之在后续的标记反应中不可逆地失活。
 
SNAP-Surface 阻断剂也与 SNAP-tag 发生不可逆反应,使之在随后的标记步骤中失活。该阻断剂不能透过细胞膜,仅可阻断暴露于细胞表面的SNAP-tag。

相关产品

SNAP-Cell 阻断剂

CLIP-Cell 阻断剂

SNAP-Surface 阻断剂

Luciferase Cell Lysis Buffer(已停产且无替代库存售完为止)–NEB

产品资料 – Buffers – Buffers

Luciferase Cell Lysis Buffer(已停产且无替代库存售完为止)                              收藏

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#B3321S
25 ml
659.00元

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product information

 Luciferase Cell Lysis Buffer (LCLB) is a proprietary formulation developed to produce mammalian cell lysates for reporter assays. This lysis buffer is compatible with reagents for assaying the activity of Gaussia as well as other luciferases (e.g. Renilla & Firefly) and β-galactosidase (Figure 1A-D).

Luciferase Cell Lysis Buffer(已停产且无替代库存售完为止)--NEB

properties and usage

 Storage Temperature

  4°C

ATP 双磷酸酶–NEB

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶

ATP 双磷酸酶                              收藏

ATP 双磷酸酶--NEB ATP 双磷酸酶--NEB ATP 双磷酸酶--NEB ATP 双磷酸酶--NEB ATP 双磷酸酶--NEB

货 号
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上海库存
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#M0398L
50 units
3,459.00元

#M0398S
10 units
859.00元

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特性

 高效将 ATP 转化为 AMP
 在 DNA 测序循环中去除脱氧核糖核苷酸
 将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为可连接的单磷酸化 RNA
 将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为单磷酸 RNA,后者可被 5´ 核酸外切酶 XRN-1(NEB #M0338)切割
 提供 10 倍高浓度产品 

概述

ATP 双磷酸酶(重组酶,E. coli)是一种高效 ATP 双磷酸酶。该酶可相继催化去除 ATP 的磷酸基团生成ADP,然后 ADP 生成 AMP,释放无机磷酸盐。该酶为重组酶,是三磷酸腺苷双磷酸酶的一个亚型。它可以水解三磷酸和双磷酸核苷以及脱氧核糖核苷生成相应的单磷酸核糖核苷。三磷酸腺苷双磷酸酶可以相继去除 γ 和 β 磷酸基团,将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为单磷酸化 RNA。 

来源

纯化自大肠杆菌,其携带有编码马铃薯 ATP 双磷酸酶的基因(S. tuberosum apyrase)。 

反应条件

1X Apyrase 反应缓冲液。
[20 mM MES, 50 mM NaCl, 5 mM CaCl2, 1 mM DTT,0.05% Tween 20,(pH 6.5 @ 25℃)]。

热失活:65℃ 温育 20 分钟。 

质保声明

ATP 双磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,1X Apyrase 反应缓冲液,30℃ 条件下,1 分钟内催化 1 μmol ATP(1 μM, NEB #P0756)释放 1 μmol 无机磷酸盐所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

500 units/ml。 

注意事项

Apyrase 对 ATP 和 ADP 的催化活性比高达 14:1。
Apyrase 是一种钙激酶。在 Apyrase 反应缓冲液中,Mg2+ 代替 Ca2+,Apyrase 大约有 50% 的活性。
作为金属离子依赖性的酶,EGTA 和 EDTA 可以抑制 Apyrase 的活性。
在 NEBuffers 1.1、2.1、3.1 和 CutSmart Buffer 中大约有 30% 的活性。
Apyrase 不会去除真核 mRNA 5´ 端的帽结构。 

SNAP-捕获磁珠–NEB

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

SNAP-捕获磁珠                              收藏

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#S9145S
2 ml
2,669.00元

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特性

 从溶液中选择性捕获 SNAP-tag 融合蛋白
 适用于蛋白质 pull-down 实验或蛋白质组学分析

概述

SNAP- 捕获产品是耦联有苄基鸟嘌呤底物的琼脂糖或磁性琼脂糖珠,可用于从溶液中选择性捕获和固定   SNAP-tag 融合蛋白。这些微珠对 SNAP-tag 融合蛋白结合容量很高,对复杂的细胞裂解液中的蛋白表现出极低的非特异性结合。这些特点使得该产品适于进行 pull-down 实验。

 
SNAP-捕获磁珠--NEB
 

相关产品

SNAP-捕获 Pull-Down 树脂

ScaI-HF(星选酶)–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

ScaI-HF(星选酶)                              收藏

ScaI-HF(星选酶)--NEB ScaI-HF(星选酶)--NEB ScaI-HF(星选酶)--NEB ScaI-HF(星选酶)--NEB ScaI-HF(星选酶)--NEB ScaI-HF(星选酶)--NEB ScaI-HF(星选酶)--NEB ScaI-HF(星选酶)--NEB

货 号
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#R3122L
5,000 units
3,019.00元

#R3122M
(高浓度5X)5,000 units
3,019.00元

#R3122S
1,000 units
689.00元

#R3122V
500 units
359.00元

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识别位点

ScaI-HF(星选酶)--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

ΦX174 RF II DNA–NEB

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆质粒 & DNA

ΦX174 RF II DNA                              收藏

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#N3022L
150 μg
3,149.00元

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特性

• 常用的 DNA 底物
• 双链切刻环状 ΦX174 

浓度

1,000 μg/ml 

分子量/长度

3.5 x 106 Da/5,386 bp 

NEBNext dA-Tailing Reaction Buffer–NEB

产品资料 – Buffers – Buffers

NEBNext dA-Tailing Reaction Buffer                              收藏

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#B6059S
2 ml
599.00元

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概述

New England Biolabs supplies a 10X reaction buffer for use with Klenow Fragment (3´→5´ exo).

At a 1X concentration this reaction buffer assures optimal activity of the enzyme.

 

1X Buffer Components

10 mM Tris-HCl

10 mM MgCl2

50 mM NaCl

1 mM DTT

0.2 mM dATP

pH 7.9@25°C

贮存温度

-20°C

 

 

请登陆 NEBNextSelector.neb.com 可以使用在线产品选择工具进行产品选择。

NEBuffer 2–NEB

产品资料 – Buffers – Buffers

NEBuffer 2                              收藏

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#B7002S
5 ml
339.00元

#B7002V
1.25 ml
179.00元

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Description

NEBuffer 2:
50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM dithiothreitol (pH 7.9 @ 25℃)。

 

BsiHKAI–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

BsiHKAI                              收藏

BsiHKAI--NEB BsiHKAI--NEB BsiHKAI--NEB BsiHKAI--NEB BsiHKAI--NEB BsiHKAI--NEB

货 号
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#R0570L
5,000 units
3,079.00元

#R0570M
(高浓度5X)5,000 units
3,079.00元

#R0570S
1,000 units
729.00元

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BsiHKAI--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,65℃。

浓度

10,000 units/ml。

37℃ 时活性

5%。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

BsiHKAl 是 HgiAl 的完全同裂酶。

M13mp18 RF I DNA–NEB

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆质粒 & DNA

M13mp18 RF I DNA                              收藏

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#N4018S
10 μg
869.00元

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特性

• 噬菌体 M13 衍生噬菌体载体
• 共价闭环 DNA
• β-半乳糖甘酶 13 个独特的 RE 位点
• 蓝/白斑筛选 

浓度

100 μg/ml 

分子量/长度

7,249 bp 

pGLuc-Basic 2 载体(已停产且无替代品)–NEB

产品资料 – 细胞分析 – Gaussia & Cypridina荧光素酶报告基因

pGLuc-Basic 2 载体(已停产且无替代品)                              收藏

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#N8082S
20 μg
.00元

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概述

所有 GLuc 载体和质粒包含一个人源化的 Gaussia 荧光素酶编码序列,可以在哺乳动物细胞中进行最佳表达。

克隆载体

pGLuc-Basic 2 载体不含启动子,将启动子或增强子克隆进入多克隆位点(MCS),便可进行启动子和/或增强子的活性测试。
 
pGLuc-Basic 2 携带有一个新霉素(Neomycin)抗性标记,用以产生稳定的转染细胞系。

对照质粒

pCMV-GLuc 2 对照质粒携带有一个组成型的巨细胞病毒(CMV)启动子,可在许多类型的细胞中启动高水平的表达。pCMV-GLuc 2 可以在转染实验中单独或与其它报告载体联合使用作为阳性对照。
 
pSV40-GLuc 对照质粒在猿猴病毒 40(SV40)启动子控制下组成型表达 GLuc。可以作为转染实验中的阳性对照。该质粒不携带选择标记。

来源

GLuc 载体和对照质粒经过标准质粒纯化程序,分离自 E. coli 菌株 ER2272。

浓度

500 μg/ml。

参考文献

关于该类产品性质和应用的文献,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

限制性酶切图谱

pGLuc-Basic 2 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 384 页。查看荧光素酶载体和对照质粒的序列文件,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

Bsp1286I(星选酶)–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

Bsp1286I(星选酶)                              收藏

Bsp1286I(星选酶)--NEB Bsp1286I(星选酶)--NEB Bsp1286I(星选酶)--NEB Bsp1286I(星选酶)--NEB Bsp1286I(星选酶)--NEB Bsp1286I(星选酶)--NEB Bsp1286I(星选酶)--NEB

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#R0120S
500 units
689.00元

#R0120V
250 units
359.00元

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识别位点

Bsp1286I(星选酶)--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 25%
NEBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、省时酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。

浓度

5,000 units/ml。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

B s p 1 2 8 6 l 识别六种不同的序列:GGGCCC、GAGCCC(互补GGGCTC)、GTGCCC(互补 GGGCAC)、GAGCAC、GTGCAC 和 GAGCTC(互补 GTGCTC)。
如下条件可能出现星号活性:延时酶切、高酶浓度或甘油浓度 > 5%。

p19 siRNA 结合蛋白(停产)–NEB

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

p19 siRNA 结合蛋白(停产)                              收藏

p19 siRNA 结合蛋白(停产)--NEB

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#M0310S
1,000 units
819.00元

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停产通知

 产品于 2020年 1 月 2 日停产.

相关产品

几丁质树脂 
几丁质磁珠

特性

 与 siRNA 结合效率高
 可通过几丁质磁珠亲和纯化 siRNA 

概述

p19 siRNA 结合蛋白分子量为 19 kDa,来自于植物香石竹意大利环斑病毒(CIRV)。该蛋白与 siRNA 具有纳摩尔级的亲和力,和 3´ 末端有 2 个核苷酸突出、5´ 末端是磷酸基的 21 nt siRNA 结合力高于其它片段。该蛋白是以二聚体的形式与 siRNA 结合,结合力取决 RNA 片段大小,而与 RNA 序列无关。如果 siRNA 的长度增加 4 个碱基,则与蛋白的亲和力会下降约 100 倍。当 p19 siRNA 结合蛋白在植物体内表达时,能抑制 RNAi 作用。 

来源

p19 siRNA 结合蛋白以融合蛋白的形式在大肠杆菌中克隆和表达。其 N 末端带有 MBP(麦芽糖结合蛋白),C 末端带有 CBD(几丁质结合蛋白)。 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。产品经纯化,琼脂糖凝胶电泳后 EB 染色检测,无 DNA 或 RNA 污染。 

单位定义

1 单位指 25℃ 条件下,1 小时内结合 10 ng 的 siRNA 所需要的蛋白量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

分子量

67 kDa。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

Monarch® Bead Retainers–NEB

产品资料 – 核酸纯化 – 基因组DNA提取

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货 号
规 格
价 格
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#T3004L
100 Retainers
349.00元

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Advantages and Features

 Monarch® Bead Retainers--NEB

Product Information

 Monarch Bead Retainers are plastic parts, resembling spin columns without a membrane, designed and used to retain the Monarch DNA Capture Beads (NEB #T3005) during the Monarch HMW DNA extraction workflow. They are compatible with Monarch Collection Tubes II (NEB #T2018).

Properties & usage

Storage Temperature
25°C