Esp3I–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

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#R0734L
1,500 units
4,119.00元

#R0734S
300 units
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Esp3I--NEB

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反应条件

 CutSmart缓冲液,37℃

热失活

 65℃ 20 分钟。

浓度

 10,000 units/ml。

甲基化敏感性

 对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感

Monarch总RNA小量提取酶试剂(含DNase I蛋白酶K和缓冲液)–NEB

产品资料 – 核酸纯化 – RNA提取和纯化

Monarch总RNA小量提取酶试剂(含DNase I蛋白酶K和缓冲液)                              收藏

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#T2019L
1 包
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相关产品

Monarch RNA 纯化离心柱
Monarch gDNA 去除离心柱
Monarch 收集管II
Monarch DNA/RNA 保护试剂
Monarch RNA 裂解缓冲液
Monarch总RNA小量提取酶试剂(含DNase I蛋白酶K和缓冲液)
Monarch RNA 结合缓冲液
Monarch RNA 漂洗缓冲液

性能

 可应用于各种类型样本
 纯化回收几乎所有片段大小的 RNA,包括 miRNA 和 > 20 nt 的小 RNA
 提供 DNase I、gDNA 去除离心柱、蛋白酶 K 和稳定试剂

概述

Monarch 总 RNA 小量提取试剂盒是一款提取并纯化总 RNA 的全能解决方案试剂盒,能做到样本保存、细胞裂解、gDNA 去除,适用于各种生物样本,如培养细胞、血液和哺乳动物组织,也适用于难裂解样本,如细菌、酵母和植物,只要增加一步来提高裂解效率。该试剂盒还可以用于纯化、酶学反应后的样本或者 TRIzol® 提取的样本,提取纯化后的 RNA 具有极高质量:A260/280 和 A260/230 比值均 ≥1.8、高 RIN 值和无 gDNA 残留;并且 RNA 片段包含完整的 miRNAs 和完整的 rRNAs。另外,改变结合条件可以选择性地筛选小于 200 nt 的 RNA,包含miRNA、5S rRNA 和 tRNA。提取纯化得到的 RNA 可用于 RT-qPCR、
cDNA 合成、RNA-seq、Northern blot 分析等下游实验。

特性

• 结合能力:100 µg RNA
• RNA 大小:> 20 nt
• 纯度:A260/280 和 A260/230 ≥1.8
• 起始样本量:最多 107 或 50 mg 组织
• 洗脱体积:50-100  µl
• 得率:依样本类型而定
• 下游应用:NGS RNA 文库制备、RT-PCR、RT-qPCR 和 Northern blots

Monarch 总 RNA 小量提取试剂盒组成:

– Monarch 总 RNA 小量提取酶试剂(含 DNase I、蛋白酶 K 和缓冲液)
– Monarch 无核酸酶水
– Monarch RNA 纯化离心柱
– Monarch DNA/RNA 保护试剂
– Monarch RNA 裂解缓冲液
– Monarch RNA 结合缓冲液
– Monarch RNA 漂洗缓冲液
– Monarch gDNA 去除离心柱
– Monarch 收集管 II

BtsI-v2–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

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BtsI-v2--NEB BtsI-v2--NEB BtsI-v2--NEB BtsI-v2--NEB BtsI-v2--NEB BtsI-v2--NEB BtsI-v2--NEB BtsI-v2--NEB

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#R0667L
2,500 units
3,269.00元

#R0667S
500 units
799.00元

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BtsI-v2--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、省时酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,55℃。

浓度

10,000 units/ml。

37℃ 时活性

75%。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

如下条件可能出现星号活性:延时酶切、高酶浓度或甘油浓度 > 5%。

表达菌株感受态细胞选择图表–NEB

产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 :无细胞表达

表达菌株感受态细胞选择图表                              收藏

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特性

 无动物制品污染
 T1 噬菌体抗性(fhuA2)
 蛋白酶 Lon 和 OmpT 缺陷型 B 菌株
 提供各种方便的剂型
 可根据客户定制包装批量销售 

概述

NEB 提供多种适用于各类蛋白表达的感受态细胞。Shuffle® 菌株在表达含多个二硫键的重组蛋白时,显著提高形成正确二硫键的能力。通过 Lemo21(DE3)可实现 T7 的可调控表达,这种菌株是表达包括膜蛋白在内的问题蛋白的理想选择。NiCo21(DE3)可用于 His 标记蛋白的表达和纯化。NEB 表达系统和 T7 表达系统均可实现对蛋白表达水平的调控。其中有些菌株可以通过 lacIq 调控非T7 质粒的诱导(IPTG)表达。然而只有 NEB 提供通过 lysY 基因对表达进行更为严格调控的菌株。每种表达菌株都提供一份优化的表达方案。

更多信息参见 204-215 页。 

表达菌株

表达菌株感受态细胞选择图表--NEB

注:感受态细胞应贮存于 -80℃,一旦融化,就不能再被冻存。-20℃ 贮存会显著降低其转化效率。只要温度高于 -80℃,即使未被融化,细胞转化效率也会降低。

* NEB Express 是 pMAL 蛋白融合表达与纯化系统的推荐菌株。 

Monarch RNA 纯化柱(10 µg)–NEB

产品资料 – 核酸纯化 – RNA提取和纯化

Monarch RNA 纯化柱(10 µg)                              收藏

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#T2037L
100 columns
2,449.00元

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相关产品

Monarch RNA 纯化柱(10 µg)
Monarch RNA 纯化柱(50 µg)
Monarch RNA 纯化柱(500 µg)
Monarch 收集管II
Monarch RNA 纯化结合缓冲液
Monarch RNA 纯化洗涤缓冲液
无核酸酶水

特性

 3种结合力和洗脱体积可选

轻松快速地从体外转录反应(IVT)中纯化获得高产量和高质量的RNA

高效去除RNA样本中的游离核苷酸

适用于HiScribeTM试剂盒体外转录之后的RNA 纯化。

概述

该产品是 RNA 纯化浓缩试剂盒,采用了简单快速的硅胶膜离心技术,适用于酶学反应后 RNA,如:体外转录(IVT)、 DNaseI 处理、加帽和标记等;也适用于 RNA提取后的样本,如:苯酚/氯仿提取的 RNA。NEB 提供三种不同结合力的试剂盒:10 μg、50 μg 和500μg,每一款试剂盒所用纯化柱都是经过独特设计以确保无缓冲液、无残留污染、低洗脱体积,可获得高纯度RNA。按着标准说明书,适合纯化RNA ≥25 nt的片段。通过调整说明书,可将回收片段大小从 25 nt降低到 15 nt(包括miRNAs)。

应用

 RNA 纯化和浓缩(包括来源TRIzol提取的 RNA)

酶学反应纯化
体外转录纯化
胶回收RNA纯化
回收不同大小片段 RNA
 

Monarch RNA 纯化试剂盒组成

 Monarch RNA 纯化试剂盒组成:

– Monarch RNA 纯化柱(10、50或者500 µg)
– Monarch RNA 纯化结合缓冲液
– Monarch RNA 纯化洗涤缓冲液
– Monarch 收集管II
-无核酸酶水
 
Monarch RNA 纯化柱(10 µg)--NEB
Monarch RNA纯化试剂盒用不同洗脱体积回收RNA。rRNA (来自Sigma 大肠杆菌 16s和 23srRNA标准物各10μg、50μg或者 500 μg)用MonarchRNA 纯化试剂盒(10 μg,NEB #T2030)(50 μg,NEB #T2040) (500 μg,NEB #T2050)进行纯化。用无核酸酶水洗脱RNA。RNA回收率的百分比用Trinean® DropSense® 16测量的A260进行计算得到。当 MonarchRNA 纯化试剂盒(10 μg,NEB #T2030;50 μg,NEB #T2040;500 μg,NEB #T2050)的洗脱体积是6μl、20μl和 50 μl时,大约 80%的 RNA 可高效回收。

Monarch RNA 纯化试剂盒(10 µg)–NEB

产品资料 – 核酸纯化 – RNA提取和纯化

Monarch RNA 纯化试剂盒(10 µg)                              收藏

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#T2030L
100 preps
3,419.00元

#T2030S
10 preps
639.00元

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Monarch RNA 纯化柱(10 µg)

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特性

 3种结合力和洗脱体积可选

轻松快速地从体外转录反应(IVT)中纯化获得高产量和高质量的RNA

高效去除RNA样本中的游离核苷酸

适用于HiScribeTM试剂盒体外转录之后的RNA 纯化。

概述

该产品是 RNA 纯化浓缩试剂盒,采用了简单快速的硅胶膜离心技术,适用于酶学反应后 RNA,如:体外转录(IVT)、 DNaseI 处理、加帽和标记等;也适用于 RNA提取后的样本,如:苯酚/氯仿提取的 RNA。NEB 提供三种不同结合力的试剂盒:10 μg、50 μg 和500μg,每一款试剂盒所用纯化柱都是经过独特设计以确保无缓冲液、无残留污染、低洗脱体积,可获得高纯度RNA。按着标准说明书,适合纯化RNA ≥25 nt的片段。通过调整说明书,可将回收片段大小从 25 nt降低到 15 nt(包括miRNAs)。

应用

 RNA 纯化和浓缩(包括来源TRIzol提取的 RNA)

酶学反应纯化
体外转录纯化
胶回收RNA纯化
回收不同大小片段 RNA
 

Monarch RNA 纯化试剂盒组成

 Monarch RNA 纯化试剂盒组成:

– Monarch RNA 纯化柱(10、50或者500 µg)
– Monarch RNA 纯化结合缓冲液
– Monarch RNA 纯化洗涤缓冲液
– Monarch 收集管II
-无核酸酶水
 
Monarch RNA 纯化试剂盒(10 µg)--NEB
Monarch RNA纯化试剂盒用不同洗脱体积回收RNA。rRNA (来自Sigma 大肠杆菌 16s和 23srRNA标准物各10μg、50μg或者 500 μg)用MonarchRNA 纯化试剂盒(10 μg,NEB #T2030)(50 μg,NEB #T2040) (500 μg,NEB #T2050)进行纯化。用无核酸酶水洗脱RNA。RNA回收率的百分比用Trinean® DropSense® 16测量的A260进行计算得到。当 MonarchRNA 纯化试剂盒(10 μg,NEB #T2030;50 μg,NEB #T2040;500 μg,NEB #T2050)的洗脱体积是6μl、20μl和 50 μl时,大约 80%的 RNA 可高效回收。

AatII(星选酶)–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

AatII(星选酶)                              收藏

AatII(星选酶)--NEB AatII(星选酶)--NEB AatII(星选酶)--NEB AatII(星选酶)--NEB AatII(星选酶)--NEB AatII(星选酶)--NEB AatII(星选酶)--NEB AatII(星选酶)--NEB

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#R0117L
2,500 units
2,779.00元

#R0117S
500 units
659.00元

#R0117V
250 units
349.00元

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AatII(星选酶)--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 50%*
NEBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 100%

反应条件

CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。

浓度

 20,000 units/ml

甲基化敏感性

 对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感。

注意事项

 如果反应缓冲液在 25℃ 条件下,pH 值不在 7.5 至 8.0 范围内,酶活性会降低。


*在该缓冲液中可能出现星号活性。

特性

 CutSmart、重组酶、省时酶。

RecJf 核酸外切酶–NEB

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

RecJf 核酸外切酶                              收藏

RecJf 核酸外切酶--NEB RecJf 核酸外切酶--NEB RecJf 核酸外切酶--NEB RecJf 核酸外切酶--NEB RecJf 核酸外切酶--NEB

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#M0264L
5,000 units
2,989.00元

#M0264S
1,000 units
749.00元

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特性

 特异性 5´ →3´ 单链 DNA 核酸外切活性
 从 DNA 上切下单磷酸脱氧核苷酸 

概述

 RecJf 作用于单链 DNA,沿 5´ →3´ 方向催化去除单磷酸脱氧核苷酸。RecJf 与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合表达,增强了 RecJf 的溶解度。

当底物为 5´ 端突出了 22 个核苷酸的 DNA 时,经RecJf 酶切后可得到含有以下三种末端的混合产物:平齐末端、5´ 突出末端(1-5 个核苷酸)和5´ 凹陷末端(1-8 个核苷酸)。RecJf 发挥活性时无需 5´ 末端磷酸化。

来源

RecJf 作为麦芽糖结合蛋白(MBP) C 端融合蛋白而表达。MBP 不影响 RecJf 的催化活性,但提高了其溶解度。 

反应条件

1X NEBuffer 2
[50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

RecJf 核酸外切酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,30 分钟内产生 0.05 nmol 可溶于 TCA 的脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

30,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

BstZ17I-HF(星选酶)–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 高保真限制性内切酶

BstZ17I-HF(星选酶)                              收藏

BstZ17I-HF(星选酶)--NEB BstZ17I-HF(星选酶)--NEB BstZ17I-HF(星选酶)--NEB BstZ17I-HF(星选酶)--NEB BstZ17I-HF(星选酶)--NEB BstZ17I-HF(星选酶)--NEB BstZ17I-HF(星选酶)--NEB BstZ17I-HF(星选酶)--NEB BstZ17I-HF(星选酶)--NEB

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#R3594L
5,000 units
3,329.00元

#R3594S
1,000 units
809.00元

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BstZ17I-HF(星选酶)--NEB

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反应条件:

 CutSmart 缓冲液,37℃。

浓度:

 20,000 units/ml。

甲基化敏感性:

 对哺乳动物基因组 DNA CpG 甲基化敏感

重组人源组蛋白 H3.3–NEB

产品资料 – 表观遗传学 – 组蛋白

重组人源组蛋白 H3.3                              收藏

重组人源组蛋白 H3.3--NEB 重组人源组蛋白 H3.3--NEB 重组人源组蛋白 H3.3--NEB

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#M2507S
100 μg
979.00元

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概述

组蛋白 H3 与 H4 结合形成 H3/H4 四聚体。两个 H2A/H2B 异源二聚体与一个 H3/H4 四聚体结合形成组蛋白八聚体。组蛋白 H3.3 可作为多种酶的底物并被修饰,这些修饰在基因调控中相当重要。
 
组蛋白 H3.3 是 H3 的变异蛋白之一,从酵母到人类所有真核细胞中均有发现,为 DNA 复制和细胞循环周期所必须,是非分裂细胞中最常见的 H3 蛋白。此蛋白常以共价修饰的形式存在,这与基因激活有关。
重组人源组蛋白 H3.3--NEB

来源

携带克隆有人源组蛋白 H3.3 基因 H3F3A 或 H3F3B 质粒的 E. col i 菌株(GenBank 登录号:AK311905)

其他名称

组蛋白 H3.3A、H3F3、H3.3B。

质保声明

未检测到蛋白酶和核酸内切酶、外切酶污染。

浓度

1 mg/ml

参考文献

有关该产品性质和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

T3 RNA 聚合酶–NEB

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

T3 RNA 聚合酶                              收藏

T3 RNA 聚合酶--NEB T3 RNA 聚合酶--NEB

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#M0378S
5,000 units
829.00元

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相关产品

T7 RNA 聚合酶
SP6 RNA 聚合酶

特性

 制备放射性标记的 RNA 探针
 合成用于体外翻译的 RNA
 合成用于 RNA 结构、加工和催化性能研究的 RNA
 合成 反义 RNA,调控基因表达 

概述

T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。现已开发出多种载体,可将目的基因序列克隆到 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中,以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性,可进行准确剪切。实验证实,用靶标 DNA 反向转录所产生的反义 RNA 能特异性阻断体内 mRNA 的翻译。由于RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定,因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。

来源

SP6 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株,该菌株携带克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。 T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株,该菌株携带含可诱导的 lac UV5 启动子及其控制的 T7 基因 I 的 pAR1219 载体。T3 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株,该菌株携带可表达T3 基因载体。

反应条件

1X RNAPol 反应缓冲液 [40 mM Tris-HClpH 7.9),6 mM MgCl22 mM 亚精胺,1 mM DTT]。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP(不随酶提供)和带有启动子的模板 DNA,在 37 ℃ 温育。

质保声明

无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下, 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。

浓度

T3 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;T7 RNA 聚合酶:50,000 units/ml;SP6 RNA 聚合酶:20,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。 

NEBuilder 高保真 DNA 组装克隆试剂盒–NEB

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆 & 合成生物学

NEBuilder 高保真 DNA 组装克隆试剂盒                              收藏

NEBuilder 高保真 DNA 组装克隆试剂盒--NEB

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#E5520S
10 次反应
3,009.00元

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特性

NEBuilder 高保真 DNA 组装克隆试剂盒--NEB

概述

NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液可以高效、准确的组装 DNA 片段。不管片段的长度和末端匹配性如何,该方法均可以多片段无缝组装。还可以组装单链寡核苷酸或含 15-80 bp 重叠区的不同片段长度的 DNA 片段。主要用于合成生物学和多片段的一步克隆,该产品操作简单、灵活,以预混液形式提供。在同一反应缓冲液中有几种不同的酶活性:
• 外切酶活性会产生单链 3´ 突出端,促使互补的末端重复序列(重叠区)退火
 
• 聚合酶活性会填补退火片段的缺口
 
• 连接酶活性能在组装后的 DNA 切刻处进行连接最终形成双链闭合的 DNA 分子,可以用于 PCR、RCA 或其它的分子生物学应用,以及直接转化到大肠杆菌。
 
NEBuilder 高保真 DNA 组装克隆试剂盒包含高效的 NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液和 NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞,仅 2 小时即可完成组装和转化实验。
 
NEBuilder 高保真试剂盒有两种:含 NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞(克隆试剂盒,NEB #E5520);含 NEB 10-beta E. coli 感受态细胞(大片段组装试剂盒,NEB #E2623)。NEB 5-alpha 感受态细胞适用于小于等于 15 kb 质粒的转化。对于大于 15 kb 质粒的转化,NEB 推荐 NEB 10-beta 感受态细胞。
NEBuilder 高保真 DNA 组装克隆试剂盒--NEB

NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液包含

– NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液
– NEBuilder 阳性对照

NEBuilder 高保真 DNA 组装克隆试剂盒包含

– NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液

– NEBuilder 阳性对照

– NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞(高效级)
– SOC Outgrowth 培养基
– pUC19 对照 DNA

质保声明

NEBuilder 高保真 DNA 组装试剂盒经过严格的质控检测,以确保产品的最高活性和纯度。更多详细信息,请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

BioLux Gaussia 荧光素酶检测试剂盒(已停产且无替代品)–NEB

产品资料 – 细胞分析 – Gaussia & Cypridina荧光素酶报告基因

BioLux Gaussia 荧光素酶检测试剂盒(已停产且无替代品)                              收藏

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#E3300L
1,000 次检测
.00元

#E3300S
100 次检测
.00元

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特性

 启动子/增强子分析
 高通量分析
 转染条件优化
 与其它报告系统一起进行多重分析
 分泌途径分析
 siRNA 筛选
 时间曲线研究
 单细胞分析,包括干细胞和原代细胞
 活细胞分析
 
BioLux 检测试剂盒可以单独使用,也可以作为双系统与其它试剂盒联合使用。
 
NEB 为研究者提供可以检测细胞培养物上清或裂解物中 Gaussia 荧光素酶(GLuc)或 Cypridina 荧光素酶(CLuc)活性的试剂盒。因为 GLuc 和 CLuc 使用不同的底物,并且无交叉反应,因此,当一种荧光素酶存在时,并不影响另一种荧光素酶的活性测定,这使得这些荧光素酶可作为双重报告系统使用。

概述

BioLux Gaussia 荧光素酶检测试剂盒含有检测 GLuc 活性所必需的试剂。该试剂盒最常用于直接检测细胞上清液,也可用于检测细胞裂解液。通过精心设计,该试剂盒具有最大的光信号输出。
 
该检测试剂盒还可以灵活选择较强的荧光信号或较长的信号半衰期。该试剂盒包含稳定剂,加入后可以增加信号半衰期。该试剂盒是高通量筛选的理想工具(见图)。
 
BioLux Gaussia 荧光素酶检测试剂盒也可用来检测海肾荧光素酶的活性,因为 GLuc 和海肾荧光素酶都可以氧化腔肠素(coelenterazine)。
 
BioLux Cypridina 荧光素酶检测试剂盒含有检测 CLuc 活性所必需的试剂。该系统可用于检测细胞培养物上清或细胞裂解物。该系统使用 vargulin 荧光素作为底物。
 
BioLux Gaussia 荧光素酶检测试剂盒(已停产且无替代品)--NEB

BioLux 试剂盒组成

 BioLux Gaussia 荧光素酶检测试剂盒(已停产且无替代品)--NEB

Luna® Cell Ready 裂解模块–NEB

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – qPCR & RT-qPCR

Luna® Cell Ready 裂解模块                              收藏

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#E3032S
100 rxns
5,939.00元

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特性

 ·仅需 15 分钟即可完成细胞裂解、RNA 释放和基因组 DNA 去除
 ·一次反应高效可裂解 10 至 10 万个细胞,适用于众多细胞系
 ·与其它 RNA 提取方法相比减少了样品损失,尤其对于低细胞起始量。
 ·兼容高通量应用,可在室温下进行细胞裂解
 ·与 Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒搭配使用时性能最佳:NEB#E3005(染料法)或 NEB#E3006(探针法) 
 ·提供完整的细胞裂解和一步法 RT-qPCR 试剂盒方案:NEB #E3030(染料法)或 NEB #E3031(探针法)

概述

   细胞培养常用于替代活体生物来分析基因表达或对治疗的反应。传统上使用柱提法或化学试剂法从处理过的细胞中提取和纯化 RNA.Luna Cell Ready 裂解模块无需进行传统的 RNA 提取步骤即可评估RNA表达水平,是一种快速、方便且灵敏的替代方案。该模块可同时进行细胞裂解、RNA 释放、基因组 DNA 去除,获得的细胞裂解物可直接使用Luna通用一步法 RT-qPCR 试剂盒进行 RT-qPCR 分析。与其它 Luna 产品一样,裂解缓冲液包含惰性蓝色示踪染料,使整个加样流程可视化。

下表列出的细胞系可使用 Luna Cell Ready 裂解模块裂解。这些细胞进行 5 log 梯度稀释(100000-10 细胞/50 µl 裂解反应),并取 1 ul 裂解产物进行 20 µl 体系的一步法 RT-qPCR 反应。每个细胞系的线性结果区域显示在最后一列。此外,经测试一些昆虫细胞系也能用上述裂解液裂解。

 

表一:经验证过的细胞系

细胞系

特性

菌种

50 ml 裂解体系中的细胞数量

A549

Adherent

H. sapiens, Lung, carcinoma

10 – 100,000

HEK293

Adherent

H. sapiens, Kidney

10 – 100,000

HeLa

Adherent

H. sapiens, Cervix, adenocarcinoma

10 – 100,000

HepG2

Adherent

H. sapiens, Liver, carcinoma

10 – 100,000

NCI-H460

Adherent

H. sapiens, Lung, carcinoma

10 – 100,000

SK-N-SH

Adherent

H. sapiens, Brain, Neuroblastoma

10 – 100,000

U2Os

Adherent

H. sapiens, Bone, osteosarcoma

10 – 10,000

Jurkat

Suspension

H. sapiens, T lymphocyte, leukemia

10 – 100,000

K-562

Suspension

H. sapiens, Lymphoblast, leukemia

10 – 1,000

 

图一:Luna Cell Ready 一步法 RT-qPCR 实验流程

 

Luna® Cell Ready 裂解模块--NEB

 

Luna Cell Ready 裂解模块整合了 DNase I 和 Luna Cell Ready 蛋白酶的功能,可简单高效的进行细胞裂解,仅需 15 分钟即可完成细胞裂解、RNA 释放和基因组 DNA 去除。2 µl 裂解产物(相当于 0.2–4000 个细胞中的 RNA)即可实现 20 µl 体系的 RT-qPCR 反应。

 

试剂盒组分

 

随该产品提供的试剂

 

储存(°C

浓度

Luna Cell Ready Lysis Buffer

-20

2 X

Luna Cell Ready RNA Protection Reagent

-20

25 X

Luna Cell Ready Protease

-20

25 X

Luna Cell Ready Stop Solution

-20

10 X

DNase I RNase-free

-20

10 X

 实验需要但不提供的试剂耗材

  •    磷酸盐缓冲液(PBS
  •    目标特异性引物
  •    细胞
  •    Eppendorf
  •    PCR 联管
  •    PCR
  •    移液器和枪头(为减少交叉污染,应使用带滤芯的枪头)

    储存温度

 -20℃

重组人类组蛋白 H3.1/H4 四聚体–NEB

产品资料 – 表观遗传学 – 组蛋白

重组人类组蛋白 H3.1/H4 四聚体                              收藏

重组人类组蛋白 H3.1/H4 四聚体--NEB 重组人类组蛋白 H3.1/H4 四聚体--NEB

货 号
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#M2509S
1 nmol
2,879.00元

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Description:

 Histone H3.1 combines with Histone H4 to form the H3/H4 tetramer. Two H2A/H2B heterodimers interact with an H3/H4 tetramer to form the histone octamer. Histone H3.1, an H3 variant that has thus far only been found in mammals, is replication dependent and is associated with gene activation and gene silencing. The tetramer is also modified by various enzymes and can act as a substrate for them. These modifications have been shown to be important in gene regulation. Because the histones are folded with their subunit partners, the tetramer may be a better substrate for specific enzymes and modifications.

 
Human Histone H3.1 Protein Sequence: ARTKQ TARKS TGGKA PRKQL ATKAA RKSAP ATGGV KKPHR YRPGT VALRE IRRYQ KSTEL LIRKL PFQRL VREIA QDFKT DLRFQ SSAVM ALQEA CEAYL VGLFE DTNLC AIHAK RVTIM PKDIQ LARRI RGERA (Genbank accession number: AAN10051)
 
Human Histone H4 Protein Sequence: SGRGK GGKGL GKGGA KRHRK VLRDN IQGIT KPAIR RLARR GGVKR ISGLI YEETR GVLKV FLENV IRDAV TYTEH AKRKT VTAMD VVYAL KRQGR TLYGF GG (Genbank accession number: AAM83108)
重组人类组蛋白 H3.1/H4 四聚体--NEB

Source

 Purified H3.1 and H4 (NEB #M2503 and NEB #M2504) were denatured, refolded and the Histone H3/H4 Tetramer was purified by gel filtration

Properties and Usage

 Storage Temperature
-20°C

Storage Conditions

 

20 mM Tris-HCl 
2 M NaCl 
1 mM DTT 
1 mM EDTA 
pH 8.0 @ 25°C

Nb.BbvCI–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 切刻内切酶

Nb.BbvCI                              收藏

Nb.BbvCI--NEB Nb.BbvCI--NEB Nb.BbvCI--NEB Nb.BbvCI--NEB Nb.BbvCI--NEB Nb.BbvCI--NEB

货 号
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#R0631L
5,000 units
3,219.00元

#R0631S
1,000 units
809.00元

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识别位点

Nb.BbvCI--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。

浓度

10,000 units/ml。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

NEBNext Ultra II RNA 定向第二链合成模块–NEB

产品资料 – RNA 试剂 – 二代测序 RNA 文库制备试剂

NEBNext Ultra II RNA 定向第二链合成模块                              收藏

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#E7550L
96 次反应
14,939.00元

#E7550S
24 次反应
4,679.00元

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概述

The NEBNext® Ultra II Directional RNA Second Strand Synthesis Module has been optimized to

generate double-stranded cDNA from first-strand cDNA, as part of the NEBNext Directional RNA library

preparation workflow.  This workflow uses the “dUTP” method for strand-specific library construction, which

depends on incorporation of uracil into the second strand cDNA, enabled by the NEBNext Second Strand

Synthesis Reaction Buffer with dUTP Mix, included in this module.

 

The NEBNext Ultra II Directional RNA Second Strand Synthesis Module is Designed for Use with the

Following:

 –  NEBNext® Ultra II RNA First Strand Synthesis Module (NEB #E7771)

 –  NEBNext® Ultra II End Repair/dA-Tailing Module (NEB #E7546)

 –  NEBNext® Ultra II Ligation Module (NEB #E7595)

 –  NEBNext® Ultra II Q5® Master Mix (NEB #M0544)

 –  NEBNext® Oligos for Illumina®(NEB #E7335#E7500#E7710#E7730#E6609#E7600,         

    #E7535, #E7350)

随酶提供的试剂

NEBNext Second Strand Synthesis Enzyme Mix

NEBNext Second Strand Synthesis Reaction Buffer with dUTP Mix

贮存温度

 -20°C

 

请登陆 NEBNextSelector.neb.com 可以使用在线产品选择工具进行产品选择。

OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)–NEB

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 常规 PCR

OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)                              收藏

OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)--NEB OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)--NEB OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)--NEB OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)--NEB OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)--NEB OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)--NEB OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)--NEB

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#M0488L
500 次反应(50 μl 反应体系)
3,049.00元

#M0488S
100 次反应(50 μl 反应体系)
669.00元

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OneTaq 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液)

OneTaq 热启动 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)

OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)

OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)

OneTaq 聚合酶信息

OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)--NEB

概述

合酶与 Deep Vent DNA 聚合酶的混合物,可用于常规与复杂的 PCR 实验。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 外切酶活性提升了 Taq DNA 聚合酶的保真性和聚合能力。OneTaq 反应缓冲液与 High GC Enhancer的组合使得无论模板的 GC 含量高低,都只需最小的优化即能获得最高的产量。

OneTaq热启动 DNA 聚合酶

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶利用核酸适配体(aptamer)作为抑制剂,不仅使用方便,而且减少了引物二聚体和其他次级产物对反应的干扰。

这种核酸适配体抑制剂能够与聚合酶发生可逆结合,当温度低于 45℃ 时抑制聚合酶活性,因而能够在室温下建立反应。在正常的热循环条件下 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶即能被激活,无需额外的高温启动步骤。因此 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶能够替换常规的或现有的基于 Taq DNA 聚合酶的 PCR 反应。

与 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶一同提供的有标准反应缓冲液、GC 反应缓冲液和 High GC Enhancer。根据模板的 GC 含量选择缓冲液的建议见下文。

其它剂型

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型。预混液有标准或 GC 缓冲液可供选择,High GC Enhancer 随 GC 缓冲液一同提供。此外这些预混液还有Quick-Load 的形式,可用于直接凝胶上样。关于OneTaqRT-PCR 试剂盒或 OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒的详细信息见 93 页。

浓度

5,000 units/ml。

OneTaq 缓冲液选择指南

OneTaq 热启动 Quick-Load 2X 预混液(提供标准缓冲液)--NEB

BsrGI–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

BsrGI                              收藏

BsrGI--NEB BsrGI--NEB BsrGI--NEB BsrGI--NEB BsrGI--NEB BsrGI--NEB BsrGI--NEB

货 号
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上海库存
广州库存
成都库存

#R0575L
5,000 units
3,249.00元

#R0575S
1,000 units
749.00元

#R0575V
500 units
389.00元

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BsrGI--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 25%

特性

重组酶、省时酶。

反应条件

NEBuffer 2.1,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。

浓度

10,000 units/ml。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

BsrGl 是 Bsp1407l 的完全同裂酶。
60℃ 温育酶活性增加 2 倍。

LongAmp® Taq 2X 预混液–NEB

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 特殊PCR

LongAmp® Taq 2X 预混液                              收藏

LongAmp® Taq 2X 预混液--NEB LongAmp® Taq 2X 预混液--NEB LongAmp® Taq 2X 预混液--NEB LongAmp® Taq 2X 预混液--NEB LongAmp® Taq 2X 预混液--NEB LongAmp® Taq 2X 预混液--NEB

货 号
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上海库存
广州库存
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#M0287L
500次反应 (50 μl 反应体系)
5,999.00元

#M0287S
100 次反应 (50 μl 反应体系)
1,519.00元

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LongAmp® Taq 2X 预混液--NEB

概述

LongAmp Taq DNA 聚合酶是 Taq 和 Deep Vent DNA 聚合酶的优化混合,相比单用 Taq DNA 聚合酶,它能以更高的保真度扩增出更长的 PCR 产物。

LongAmp 热启动 Taq DNA 聚合酶

LongAmp 热启动 Taq DNA 聚合酶利用了一种特定合成的核酸适配体,它能够与酶可逆结合,当温度低于 45℃时抑制聚合酶活性,正常的热循环条件下释放聚合酶。

其它剂型

为了加样方便,LongAmp Taq 与 Long Amp 热启动 Taq DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择。LongAmp Taq PCR 试剂盒包含 LongAmp Taq DNA 聚合酶(2,500 units/ml)、dNTP 混合液(10 mM)、LongAmp Taq 反应缓冲液套装(5X)、MgSO4(100 mM)和无核酸酶污染的水。

浓度

2,500 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

LongAmp® Taq 2X 预混液--NEB

StyI-HF(星选酶)–NEB

产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

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货 号
规 格
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北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#R3500L
15,000 units
3,519.00元

#R3500S
3,000 units
789.00元

#R3500V
1,500 units
409.00元

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识别位点

StyI-HF(星选酶)--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 25%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。

浓度

20,000 units/ml。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

Remove-iT PNGase F–NEB

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 糖苷内切酶

Remove-iT PNGase F                              收藏

Remove-iT PNGase F--NEB Remove-iT PNGase F--NEB

货 号
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上海库存
广州库存
成都库存

#P0706L
33,750 units
9,139.00元

#P0706S
6,750 units
2,299.00元

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相关产品

几丁质磁珠

6 孔磁性分离架

12 孔磁性分离架

识别位点

Remove-iT PNGase F--NEB

Remove-iT PNGase F 水解糖肽/蛋白上所有类型的 N-糖链 [x = H 或者寡糖]。

特性

 从糖蛋白上切除 N-连接糖链
 更多详细结构特异性请翻阅目录 257页

概述

Remove-iT PNGase F 是一种酰胺酶,切割糖蛋白上的 N-连接糖,切割的糖型有:高甘露糖、杂合和复杂寡糖,切割位点为:最内侧的 N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之间(1)。Remove-iT PNGase F 携带有几丁质结合域(CBD)标签,易于从反应中去除。以不含甘油的形式提供,便于在 HPLC 和 MS 分析中取得最佳效果。

来源

从脑膜败血性杆菌(Flavobacterium meningo-septicum)中提取纯化。

反应条件

将糖蛋白于 1X DTT(40 mM)中 55℃ 温育 10 分钟使其变性。1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中 37℃ 温育 1 小时。热失活:75℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X DTT
10X GlycoBuffer 2 反应缓冲液

分子量

41,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染,无糖苷内切酶F1、F2 或 F3 活性,无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时从 5 μg DTT 变性的 RNase B 中移除超过95% 的碳水化合物所需要的酶量。

浓度

225,000 units/ml。

注意事项

当使用包含 SDS 和 DTT 的 NEB 糖蛋白变性缓冲液对 RNase B 进行变性时,需要 500,000U/ml 高浓度 Remove-iT PNGase F。
 
当 Remove-iT PNGase F 在变性条件下使用时,需要在反应混合物中加入 NP-40,因为 SDS 抑制Remove-iT PNGase F 活性。目前还不清楚非离子变性剂抵消 SDS 对 Remove-iT PNGase F 抑制的机理。
 
去糖基化反应完成后,可以用几丁质磁珠去除Remove-iT PNGase F,且几丁质磁珠的用量与去除Remove-iT PNGase F 成正比线性关系。

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

T7 表达晶体 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )–NEB

产品资料 – 感受态细胞 – 蛋白表达菌株

T7 表达晶体 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )                              收藏

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#C3022I
6 x 0.2 ml
2,839.00元

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相关产品

T7 表达晶体 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . ¥899

优点

 晶体学研究与 SeMet 标记的理想选择
 BL21 源增强型菌株
 无动物来源产品

概述

T7 表达晶体 E. coli 感受态细胞适用于高效转化和蛋白表达,专用于 x 射线结晶学研究。非常适合于对蛋白进行硒代蛋氨酸标记(蛋氨酸营养缺陷型)。

基因型

fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::miniTn10–TetS)2 [dcm] R(zgb-210::
Tn10–TetS) endA1 metB1 D(mcrC-mrr)114::IS10

特性

• T7 表达的衍生物,T7 RNA 聚合酶位于染色体上并受 lac 调控
• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失

转化效率

高效级:0.6–1 x 109 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体(fhuA2)、呋喃妥因

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、壮观霉素、链霉素、四环素

NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 1–NEB

产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于 Illumina 测序平台/Small RNA

NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 1                              收藏

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上海库存
广州库存
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#E7300L
96 次反应
59,979.00元

#E7300S
24 次反应
17,649.00元

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NEBNext Small RNA 文库制备试剂盒其它产品

NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 2

NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 (检索引物 1-48)
NEBNext Small RNA 单样本文库制备试剂盒(与多样本兼容)

概述

Small RNA 建库流程经过创新性优化,在保证制备高产量和多样性的文库的同时,能够最大限度的减少
接头二聚体的形成。接头和引物都包含在试剂盒中,并且可以实现多样本的建库。多样本建库试剂盒
包含检索引物,且兼容自备检索引物。
 
除了每种组份都经过严格的质量监控以外,NEBNext Small RNA 试剂盒还都经过构建 Small RNA 文库,再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面,各个组份的批号也都被保留下来。大多数的组份都以预混液的形式提供,从而减少了试剂盒里面的管数,也减少了移液操作的步骤。
 
NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 1--NEB

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ssDNA 接头腺苷酸化的客户,请选用  5´ DNA 腺苷化试剂盒

AlwI–NEB

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AlwI                              收藏

AlwI--NEB AlwI--NEB AlwI--NEB AlwI--NEB AlwI--NEB AlwI--NEB AlwI--NEB

货 号
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北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#R0513L
2,500 units
3,249.00元

#R0513S
500 units
749.00元

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识别位点

AlwI--NEB

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在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 50%
NEBuffer 2.1: 50%
NEBuffer 3.1: 10%

CutSmart Buffer: 100% 

特性

CutSmart、重组酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,37℃。

浓度

10,000 units/ml。 

甲基化敏感性

dam 甲基化敏感。 

注意事项

Alwl 酶切产生的 DNA 片段包含有一个碱基的 5´ 突出端,比平末端更难连接。

如下条件可能出现星号活性:延时酶切、高酶浓度或甘油浓度 > 5%。 

NEBNext Ultra II FS 片段化/末端修复/加 dA 尾模块–NEB

产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于Illumina测序平台: 模块和酶

NEBNext Ultra II FS 片段化/末端修复/加 dA 尾模块                              收藏

货 号
规 格
价 格
北京库存
上海库存
广州库存
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#E7810L
96次反应
11,879.00元

#E7810S
24次反应
3,299.00元

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产品概述

The NEBNext Ultra II FS DNA Module has been optimized to convert 100 pg – 0.5 μg of intact DNA to fragmented, end-repaired DNA having 5´ phosphorylated, 3´ dA-tailed ends. The module is optimized for use

with the NEBNext Ultra II Ligation Module (NEB #E7595), and is part of the Ultra II FS DNA workflow.

For Illumina library construction, the NEBNext Ultra II FS DNA Module is designed for use with the 

following:

  • NEBNext Ultra II Ligation Module (NEB #E7595) 
  • NEBNext Ultra II Q5® Master Mix (NEB #M0544) 
  • NEBNext Oligos for Illumina (NEB #E7335, #E7500, #E7710, #E7730, #E6609, #E7600 #E7535, 
  • #E7350) 

NEBNext Ultra II FS 片段化/末端修复/加 dA 尾模块组份

TE Buffer

NEBNext® Ultra™ II FS Enzyme Mix

NEBNext® Ultra™ II FS Reaction Buffer

贮存温度

-20°C

 

请登陆 NEBNextSelector.neb.com 可以使用在线产品选择工具进行产品选择。

pMAL™ 蛋白融合表达系统(停产,有替代)–NEB

产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 :大肠杆菌

pMAL™ 蛋白融合表达系统(停产,有替代)                              收藏

货 号
规 格
价 格
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#E8200S
1 set
6,709.00元

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停产通知

产品于2020 年 6 月 30 日停产,替代产品为:NEBExpressTM MBP 融合表达及纯化系统(E8201)

单独出售的相关产品

Amylose 树脂
#E8021V 10 ml . . . . . . .¥1,179
#E8021S 15 ml . . . . . . .¥1,779
#E8021L 100 ml . . . . . . .¥8,609
 
Xa 因子蛋白酶
#P8010V 25 μg . . . . . . . . ¥379
#P8010S 50 μg . . . . . . . . ¥729
#P8010L 250 μg . . . . . . .¥2,889
 
pMAL-p5X 载体
#N8109S 10 μg . . . . . . .¥1,069
 
pMAL-c5X 载体
#N8108S 10 μg . . . . . . .¥1,069

 

 

特性

 超过 75% 的蛋白可获得高效表达,蛋白产量可达 100 mg/L
 可在细胞质或周质中表达:在周质或SHuffle® 细胞质中表达均可提高二硫键的形成,促进蛋白折叠
 增强可溶性:MBP 融合蛋白增强了蛋白质在大肠杆菌中的可溶性
 采用麦芽糖温和洗脱:无去污剂或变性剂对蛋白活性产生影响 

对于产品详细描述和 pMAL-p5X 载体图谱,包括 MCS(多克隆酶切位点),请见目录 386 页。关于pMAL 载体序列文件,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com 查询。

概述

pMAL 系统是一种高效的蛋白融合表达及纯化系统。pMAL 载体含有编码麦芽糖结合蛋白(maltosebinding protein, MBP)的大肠杆菌 malE 基因,其下游的多克隆位点便于目的基因插入,表达 N 端带有 MBP 的融合蛋白。通过“Ptac”强启动子和 MBP 翻译起始信号使克隆基因获得高效表达,并利用 MBP 对麦芽糖的特异性结合实现融合蛋白的一步亲和纯化(图 1)。

此系统的 pMAL 载体在邻近多克隆位点处含有一段编码特异性蛋白酶识别位点的序列,从而便于纯化后将目的蛋白与 MBP 切割分离,并且目的蛋白不含任何来自载体的氨基酸。为了实现这一目的,多克隆位点中有一限制性内切酶识别位点正好位于特异性蛋白酶识别位点处,同时也是目的基因插入的位点。

pMAL 系列载体可从 1 升的培养液中表达出 100 mg 的融合蛋白。大部分情况下,表达出的融合蛋白是可溶的,因为 MBP 已经被证实可提高大肠杆菌中表达蛋白的可溶性。尽管没有一种表达系统适用于所有克隆基因,但 pMAL 蛋白融合表达和纯化系统经证实:在被检测的已知蛋白中,有超过 75% 能表达出稳定产量。

由于 pMAL-c5X 载体上删除了 malE 信号序列,因此融合蛋白在细胞质中表达。而 pMAL-p5X 载体含有 malE 信号序列,它将引导融合蛋白穿越质膜进入细胞周质。
 

pMAL™ 蛋白融合表达系统(停产,有替代)--NEB
图 1:pMAL 系统流程示意图。

pMAL 蛋白融合表达和纯化系统组成

  – pMAL-c5X, pMAL-p5X
– Amylose 树脂(结合容量 ~6-8 mg/ml 体积)
– Xa 因子蛋白酶
– MBP5(SDS-PAGE 电泳用 marker)
– MBP5-paramyosin-ΔSal
(Xa 因子蛋白酶切割的对照蛋白)
– E. coli ER2523(NEB 表达用感受态细胞)

参考文献

关于本产品特点与应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。 

EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶–NEB

产品资料 – 基因编辑 – 应用于CRISPR工作流程中的NEB特色产品

EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶                              收藏

EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶--NEB EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶--NEB EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶--NEB

货 号
规 格
价 格
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#M0653S
70 pmoles
839.00元

#M0653T
2,000 pmoles
2,999.00元

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特性

·   体外切割 dsDNA

·   通过直接导入有活性的核酸酶复合物进行基因编辑。

概述

 EnGen ® Lba Cas12aCpf1 核酸酶识别富含 T TTTN PAM 序列,为基因打靶开辟了额外的基因组区域。所需 gRNA短,仅40-44 个碱基。其有两个核定位信号,提高运输到细胞核的效率。其切割产物为5′ 突出端。该酶的活性温度区间为 16-48℃。与氨基酸球菌(Acidaminococcus)的同源酶相比,在更低温度下活性依然良好,能用于编辑冷血动物基因组,如斑马鱼和非洲爪蟾等。高浓度酶可用于显微注射、电转和脂质体转染.

反应条件

 1X NEBuffer™ 2.137 温育

热失活

 65°C10 min

浓度

 1 µM100 µM

质保声明

 EnGen ® Lba Cas12aCpf1经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com www.neb-china.com

参考文献

 关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com www.neb-china.com

Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶序列识别和 DNA 剪切工作原理示意图

 EnGen®Lba Cas12a(Cpf1) 核酸酶--NEB

Monarch 质粒小提离心柱–NEB

产品资料 – 核酸纯化 – 质粒小提

Monarch 质粒小提离心柱                              收藏

货 号
规 格
价 格
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#T1017L
100 columns
1,079.00元

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Description

Monarch Plasmid Miniprep Columns, supplied with the Monarch Plasmid Miniprep Kit, have been custom designed to deliver excellent performance for your plasmid purification. Monarch Columns are designed without a frit (which is commonly used in purification columns to hold the membrane in place), eliminating buffer retention and the risk of carry-over contamination. The tapered design of the Miniprep Column enables elution in as little as 30 μl. Monarch columns use less plastic than conventional columns, reducing their environmental footprint without compromising performance. The columns fit snugly into the collection tubes to enable easy handling. The Monarch Miniprep Columns also feature a convenient tab so that you can label your columns easily without removing them from your tube rack. Monarch columns are suitable for use with centrifugation and vacuum purification protocols. 

Monarch Plasmid Miniprep Column Design

Monarch 质粒小提离心柱--NEB

Learn More About Monarch

  • NEBMonarch.com
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  • Enhance your DNA purification experience
  • Feel good about choosing Monarch
  • Choose Monarch kits for pure value

Highlights

  • No buffer retention/risk of carryover contamination
  • Low elution volume (≥ 30 μl)
  • Convenient tab for easy labeling
  • Snug fit into collection tubes for easy handling
  • Made with less plastic than conventional columns

 

Properties and Usage

Storage Temperature

25°C

Binding Capacity

20 µg 

DNase I(无 RNase)–NEB

产品资料 – RNA 试剂 – 二代测序 RNA 文库制备试剂

DNase I(无 RNase)                              收藏

DNase I(无 RNase)--NEB DNase I(无 RNase)--NEB DNase I(无 RNase)--NEB DNase I(无 RNase)--NEB

货 号
规 格
价 格
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存

#M0303L
5,000 units
3,149.00元

#M0303S
1,000 units
779.00元

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特性

 转录反应后 DNA 模板的降解
 除去 RNA 样品中的基因组 DNA 污染
 DNase I 印迹分析
 切刻平移

概述

DNase I(无 RNase)是一种非特异性核酸内切酶,切割 DNA 产生具有 3´ 羟基和 5´ 磷酸末端的二核苷酸、三核苷酸和寡核苷酸产物。DNase I 可以作用于单链 DNA、双链 DNA、染色质和 RNA:DNA 杂交链。 

来源

重组 E. coli 菌株,含有牛胰腺 DNase I 的 MBP 融合克隆。 

反应条件

1X DNase I 反应缓冲液
[10 mM Tris-HCl (pH 7.6 @ 25℃) ,2.5 mM MgCl2,0.5 mM CaCl2],37℃ 温育。
热失活:75℃ 10 分钟。 

质保声明

无 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,10 分钟完全分解 1 μg pBR322 DNA 所需要的酶量。
完全降解是指绝大多数的 DNA 片段降解成为四核苷酸或更短的核苷酸。 

浓度

2,000 units/ml。 

注意事项

为避免酶失活过程中 RNA 被降解,应添加终浓度为 5 mM 的 EDTA。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。