橙色凝胶上样染料 6X 收藏
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概述
预混上样染料溶液用于琼脂糖和非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳,可进行不同的示踪染色。溶液中含有 SDS,可使条带清晰,避免有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。由于高浓度的 SDS 能干扰 SYBR 和 GelRed 核酸荧光染料显色。因此使用这两种核酸染料时,建议使用无 SDS 的紫色凝胶上样染料(NEB#B7025)。凝胶上样染料中的 EDTA,可螯合反应缓冲液中10 mM 的 Mg2+,从而使反应终止。溴酚蓝是电泳的标准示踪染料。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中,它的迁移率大约与 300 bp 的片段相同。橙黄
G 不会显示在凝胶电泳照片中,除了一些最小的片段,橙黄 G 跑在凝胶的最前面。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中,它的迁移率大约与 50 bp 的片段相同。NEB 也提供与溴酚蓝迁移率相似的紫色染料。该染料在紫外灯下无阴影。
凝胶上样染料组成成分
1X 凝胶上样染料,蓝色:
2.5% Ficoll-400,11 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0),0.017% SDS 和 0.015% 溴酚蓝。
1X 凝胶上样染料,橙色:
2.5% Ficoll-400,11 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0),0.017% SDS 和 0.15% 橙黄 G。
1X 凝胶上样染料,紫色:
2.5% Ficoll-400,10 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),0.08% SDS ,0.02% 染料 1 和
0.0008% 染料 2。
1X 凝胶上样染料,紫色,无 SDS:
2.5% Ficoll-400,10 mM EDTA,3.3 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),0.02% 染料 1 和 0.0008% 染料 2。
注意:25 μl 反应体系中添加 5 μl 凝胶上样染料,或 50 μl 反应体系中加 10 μl 凝胶上样染料。上样前混匀。室温保存。