核酸内切酶 VIII–NEB

产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

核酸内切酶 VIII                              收藏

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#M0299L
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特性

 单细胞凝胶电泳(彗星试验)
 碱洗脱
 碱解旋 

概述

大肠杆菌核酸内切酶 VIII 既有 N-糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性则分别在 AP 位点的 3´ 和 5´ 端切割磷酸二酯键,产生 5´ 磷酸和 3´ 磷酸末端。能被核酸内切酶 VIII 识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲 。尽管核酸内切酶 VIII 与核酸内切酶 III 的活性相似,但核酸内切酶 VIII 具有 β 和 δ 裂解酶活性,而核酸内切酶 III 只有 β 裂解酶活性。 

来源

克隆有 nei 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X Endonuclease VIII 反应缓冲液
[10 mM Tris-HCl,75 mM NaCl,1 mM EDTA(pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:75℃ 加热 10 分钟。 

质保声明

核酸内切酶 VIII 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 缓冲液体系中,37℃ 条件下,1 小时内能够切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
*AP 位点的创建方法如下:37℃ 条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)处理 10 pmol 含单一尿嘧啶碱基的 34 mer 寡核苷酸双链 2 分钟。 

彗星试验的推荐稀释倍数

1:104~1:105。详细步骤请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。