T3 RNA 聚合酶–NEB

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T3 RNA 聚合酶--NEB T3 RNA 聚合酶--NEB

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相关产品

T7 RNA 聚合酶
SP6 RNA 聚合酶

特性

 制备放射性标记的 RNA 探针
 合成用于体外翻译的 RNA
 合成用于 RNA 结构、加工和催化性能研究的 RNA
 合成 反义 RNA，调控基因表达 

概述

T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。现已开发出多种载体，可将目的基因序列克隆到 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中，以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性，可进行准确剪切。实验证实，用靶标 DNA 反向转录所产生的反义 RNA 能特异性阻断体内 mRNA 的翻译。由于RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定，因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。

来源

SP6 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株，该菌株携带克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。 T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株，该菌株携带含可诱导的 lac UV5 启动子及其控制的 T7 基因 I 的 pAR1219 载体。T3 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株，该菌株携带可表达T3 基因载体。

反应条件

1X RNAPol 反应缓冲液 [40 mM Tris-HCl（pH 7.9），6 mM MgCl2， 2 mM 亚精胺，1 mM DTT］。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP（不随酶提供）和带有启动子的模板 DNA，在 37 ℃ 温育。

质保声明

无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下， 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。

浓度

T3 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；T7 RNA 聚合酶：50,000 units/ml；SP6 RNA 聚合酶：20,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。