TSKgel Protein C4-300色谱柱
TSKgel Protein C4-300是一款适合于蛋白分析的反相色谱柱。采用3µm的硅胶填料,通过对孔径、固定相配体的烷基链长及表面键合密度的优化,可实现高分辨率和高回收率的分析。温度对分析结果的影响比较大,测定时温度越高,分辨率也越高。在蛋白分析中,使用0.05%的TFA或5mmol/L的高氯酸作为离子对试剂,是比较合适的。
TSKgel Protein C4-300与其他色谱分离模式(尺寸排阻、离子交换)相结合,可以获得关于蛋白质、多肽样品的更多信息。
TSKgel Protein C4-300 色谱柱基本信息
色谱柱基质 |
硅胶 |
平均粒径 |
3 µm |
孔径 |
300Å |
比表面积 |
100 m2/g |
表面官能团 |
C4(丁基) |
封端 |
有(三甲基硅烷) |
碳含量 |
3% |
色谱柱尺寸 |
4.6 mmI.D. ×5 cm、10 cm、15 cm |
保护柱 |
3.2 mmI.D. ×1.5 cm |
TSKgel Protein C4-300色谱柱的主要特点:
1、高分辨率
采用了3µm粒径的硅胶→更高的理论塔板数;
孔径为30nm→非常适合于蛋白质分离的孔径尺寸。
2、高回收率
优化了固定相配体的烷基链长度以及表面密度→抑制了蛋白质的吸附。
键合官能团烷基链长的优化
通过优化官能团表面键合密度,不仅提高了该产品的分辨率,同时也提高了新色谱柱的使用寿命。
蛋白质的分析实例(单克隆抗体的分析)
利用木瓜蛋白酶(蛋白消化酶)酶解鼠源单克隆抗体使其片段化,并通过尺寸排阻色谱法(SEC)及反相色谱法(RPC)进行分析。
分析结果:
实验结果表明:即使在SEC分析的同一组分(100 kDa、50 kDa)中,仍然含有多种疏水性不同的组分。